本病主要依据病史、症状体征及必要的检查结果即可确诊，其中，胃镜检查对明确诊断最为重要。具体检查方法如下：
内镜（胃镜）检查：可观察十二指肠黏膜的情况，还可在胃镜下取活组织做病理学检查和 Hp 感染检测，是诊断十二指肠溃疡的最准确的方法，也是评估治疗效果的主要方法。
X 线钡餐检查：对合并心脑血管疾病或因其他原因而无法接受内镜（胃镜）检查的患者可进行 X 线钡餐检查，通过十二指肠溃疡的特征表现（十二指肠龛影或局部痉挛、激惹及球部变形）也可进行诊断。
幽门螺旋杆菌（Hp）检测：检测是否存在幽门螺旋杆菌感染，有助于明确病因，及指导后续治疗。但是不能作为诊断十二指肠溃疡的方法。
粪便检查：大便隐血试验可以了解溃疡有无合并出血。
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