染色体检测如何选择

一、染色体核型分析：

染色体核型分析是人类染色体经过特殊染色处理可呈现一系列深浅交替的带纹，每个染色体有特定的带纹，如果染色体结构发生变异，那么带型也会发生相应变化。高分辨率（400G显带或以上）染色体核型可检查5-10M以上染色体结构变化，包括染色体数目异常和结果异常以及缺失、重复、倒位等。这种方法操作复杂，取外周血在细胞生长刺激因子-植物凝集素PHA作用下培养，加入秋水仙素使淋巴细胞停止在细胞分裂中期，经过低渗膨胀细胞，减少染色体间相互交叉和重叠，以3:1甲醇和冰醋酸预固定，镜下观察。临床常用的染色体核型检测，缺点是对于部分染色体嵌合型和微小缺失等病变无法检测，难以提供染色体变异点的精确定位。

适合人群：无精子或严重少弱精子症（＜5x10⁶/ml）、高危患者羊水穿刺细胞培养、流产绒毛培养染色体核型分析、复发性流产或反复胎停育染色体检测。

二、高通量测序：

又称下一代测序（NGS），国内NGS技术主要基于边合成边测序的Life平台，能一次并行对几十万至几百万条DNA分子进行序列测定，准确率＞98%，随着纳米单分子测序技术改进，平均测序读长＞10000bp，广泛应用无创产前检测及胚胎植入前遗传学诊断或筛查，能够利用单一平台实现单基因病和染色体异常分析。

由于基因组包含重复序列、结构变异及拷贝数变异，短读长测序平台存在固有缺陷，只能检测非平衡易位，对于平衡易位无法检出，需要检测染色体核型分析。NGS应用于遗传病，已经由基因组合向全外显子测序（WES）转变，全基因组重测序更有优势，不仅费用低，更是因为外显子组测序数据分析计算量小，与生物学表型结合更为直接。

三、染色体微阵列分析chromosomal microarray analusis（CMA）:

CMA是一项高分辨率的全基因组分析技术，又称基因芯片技术或染色体芯片分析，通过高通量特异性核酸探针对染色体全基因组进行高分辨率检测，可以检测出染色体不平衡拷贝数变异（CNV）的微缺失和微重复（50-100kb）。CMA技术分为两大类，基于微阵列的比较基因组杂交（aCGH）技术和单核苷酸多态性微阵列（SNP array）技术，通过aCGH技术很好的检测出CNV，是检测致病性CNV金标准，而SNP array除检出CNV外，还能够检测到大多数的单亲二倍体和三倍体，并且可以检测嵌合体，设计覆盖CNV+SNP检测探针的芯片，同时具有CNV和SNP芯片的特点。

CMA是先天性异常和神经发育性疾病产后诊断的一线检测技术。CMA通过未经培养的DNA取样，包括羊膜腔穿刺或绒毛活检，大大缩短了检验周期。缺点是不能检测平衡易位，对于单基因点突变相关的常染色体隐形遗传病不能检测。

四、荧光原位杂交（FISH）：

通常采用荧光素标记并与待检测的目标序列互补的寡聚核苷酸探针与变形后的染色体按照碱基互补配对原则进行杂交，在荧光显微镜下观察荧光信号，从而判断目标核算的拷贝数并定位，可定位长度在1kb的DNA序列。FISH检测判断目标核算的拷贝数并定位。FISH检测虽然准确性高，但需要实现确定检测位点信息，不能覆盖全基因组。FISH主要是用点标记，着丝粒，端粒，或片段，判断染色体或片段的位置信息，不能明确大小，与PCR差不多，判断位点有无缺失。

FISH产前诊断主要针对13、16、18、21、22、X、Y染色体数目和结构异常分析，七条染色体占所有染色体异常的80%，新生儿有意义染色体90%以上，与染色体核型结果互为补充，为产前诊断保驾护航。

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