如何进行疫苗评价？

疫苗从研发到上市用于大范围人体使用需要至少经过临床前（动物中）安全性评价，临床早期安全性评价，临床有效性评价等复杂的过程。

评价接种疫苗效果的理想方法是在疾病流行时，通过比较接种组和未接种组发生患者数的差异来进行评价，这是最客观的评价方法，临床试验所需的样本数可以满足要求。但在实际工作中，对于很少发生的疾病，难以用这种方法评价疫苗效果。因此必须采用评价免疫原性即产生免疫反应的能力作为效果评价的指标，目前主要通过对受种者接种疫苗后是否免疫成功来进行评价，即通过血清学方法检测受种者接种疫苗后抗体是否阳转。

新冠病毒疫苗功能评估的四种方法

一、注射疫苗后抗体滴度评估。

疫苗要达到好的治疗效果，首先必须能够免疫出足够强的针对病毒抗原的抗体。这一方法既适用于动物实验，也适用于临床过程以及正常人群免疫之后免疫评估。实验方法：使用目标抗原包被ELISA板（或化学发光等等效方法），然后使用免疫后的血清与之结合。采用抗人抗体检测是否显色，血清的稀释度和显色强度代表了免疫的强度。

二、阻断抗体检测

科学家已经非常了解，新冠病毒通过S蛋白与宿主细胞的ACE2结合，然后进入人体。能够阻断S蛋白与ACE2相互作用的抗体产生是疫苗产生疗效标志。实验可以通过用S蛋白包被，加入不同浓度的抗血清，用ACE2结合检测，看能否正常显色。血清的稀释度或显色强度可以表示中和抗体的强度。

除了阻断ACE2-S蛋白相互作用外，有研究发现结合于S2上的抗体可能阻断S2变构，进而阻断病毒进入细胞；也可能通过结合到S1S2的切割区域，防止蛋白酶切开，从而阻止病毒的入侵。此外，陈志南等人报导，CD147可能是新冠病毒的潜在侵染靶点；也有报导唾液酸受体作为病毒通用侵染靶点等，这些靶点的存在增加了病毒疫苗评估的困难。

三、细胞免疫的检测

由于病毒在细胞内表达自身蛋白，清除被感染的细胞，让病毒没有可以繁殖的场所，也是一种有效的阻断手段。RNA疫苗和DNA疫苗就是通过在细胞内表达自身蛋白并利用胞内的体内蛋白酶体的降解加工，成为可以结合于MHC上的小肽，从而递呈到细胞表面，并激活细胞免疫和体液免疫。通过ELISPORT或胞内流式的方法，检测经过相应抗原刺激的PBMC，可以验证疫苗是否产生了细胞免疫。

在SARS疫苗研究中，研究人员发现，去除小鼠的T细胞并不影响疫苗的保护效果，或将免疫过的小鼠T细胞移植到未免疫的小鼠并不能获得额外的保护作用，显示体液免疫是SARS疫苗的主要保护作用。

四、中和抗体检测

真正的中和抗体是指不管以何种形式阻断病毒侵染细胞的抗体。可以通过新冠病毒本身或假病毒对敏感细胞感染，并检测细胞被侵染的程度来判断新冠疫苗是否产生了中和抗体。Jagiellonian大学Milewska等人采用呼吸道原代细胞进行新冠病毒培养，发现48小时内，病毒可以扩增上千倍。

实验用野生型新冠病毒需要P3级以上实验室，研究成本较高。一种替代的方案是将VSV或慢病毒的外壳蛋白换成新冠病毒的S蛋白，用这种假病毒作为研究模型。复旦大学姜世勃等人曾将SARS病毒S蛋白替换慢病毒VSVG包装蛋白，构建了冠状病毒感染细胞的假病毒。

由于新型冠状病毒潜伏期长，存在无症状感染，加上病毒已经全球蔓延，该病毒能否从人类中消失并不取决于中国和某一个国家的防疫效果，而是取决于保护措施最差的国家。人类必须做好与新冠病毒长期共存的准备，正因为如此开发一个有保护效果的疫苗变得极其重要。我们希望上述方法能够在不同程度上方便对疫苗保护效果的评价，让我们早日恢复正常的生活。