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Smad7抑制TGF-β2的抗角膜内皮细胞增殖效应并加速内皮损伤修复

梁庆丰 副主任医师 北京同仁医院 眼角膜科
2009-07-04 2459人已读
梁庆丰 副主任医师
北京同仁医院

随着内眼手术的大量开展,角膜内皮的损伤逐渐增多,但由于角膜内皮细胞的不可再生性,给临床治疗带来许多困难,所以进一步探索影响内皮修复的因素,将成为眼科界的一个课题。已有研究表明,房水中存在着大量的转移生长因子β2(TGF-β2),它能上调角膜内皮细胞p27kip1(一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂)的表达,而p27kip1的表达抑制角膜内皮细胞的分裂,所以TGF-β2对角膜内皮细胞增殖修复起抑制作用。Smad是一个新的蛋白家族,角膜内皮细胞可以表达Smad2,3,4,7,本实验利用Smad7阻断TGF-β2在细胞内的信号传导,从而拮抗TGF-β2对角膜内皮细胞增殖的抑制效应,达到加速角膜内皮损伤修复的目的。方法:使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法来确定角膜内皮细胞Smad的表达;运用[3H]标记的胸苷摄取测定法来评价TGF-β2的抑制角膜内皮细胞DNA复制作用;用携带鼠Smad7 cDNA的腺病毒 (AdCMV- Smad7) 转染兔角膜内皮细胞, 携带鼠LacZ cDNA的腺病毒 (AdCMV-LacZ) 作为对照,并通过免疫印迹杂交的方法确定Smad7对TGF-β2的抑制作用;对表达Smad7的兔角膜内皮细胞进行体外培养,在机械损伤内皮细胞的条件下,观察其内皮修复过程。结果:1、体外培养的兔角膜内皮细胞表达Smad7。2、TGF-β2明显抑制兔角膜内皮细胞DNA的复制。3、过量表达的Smad7可消除外源性TGF-β2对内皮细胞的抗增殖作用,而LacZ无此作用。4、 携带Smad7的腺病毒转染到兔角膜内皮细胞可加速角膜内皮损伤的修复。结论:Smad7的过量表达能抑制TGF-β2的抗内皮细胞增殖作用,通过改变角膜内皮细胞对Smad7的表达,可达到治愈角膜内皮损伤的目的。体外角膜内皮损伤的修复包括内皮细胞的增殖和移行两个过程,表达Smad7的角膜内皮细胞移行过程先于增殖过程,而且过量Smad7的表达主要影响内皮细胞的移行过程。作者最后指出,改变Smad7在角膜内皮细胞的表达对内皮细胞的修复可能具有一定的临床治疗前景。首都医科大学附属北京同仁医院眼角膜科梁庆丰

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