血友病基因检测及产前诊断

一 血友病概述

定义：血友病是一组具有遗传性的、凝血功能障碍的出血性疾病。

发病特点：男女均可发病，绝大部分为男性，发病率为1/4000活产男婴，没有种族差异、区域差别。

临床特点：出血---生之具有，伴随终身。压迫症状及体征---血肿压迫周围神经可致局部疼痛、麻木及肌肉萎缩；压迫血管可致相应供血部位缺血性坏死或淤血、水肿；喉部及颈部出血可致呼吸困难甚至窒息。

防治：血友病至今没有治愈的方法，需通过产前诊断方法避免。

分类：甲型血友病（HA，约占80%、 X连锁隐性遗传）

乙型血友病（HB，约占20%、 X连锁隐性遗传）

丙型血友病（HC，罕见，常染色体不完全隐性遗传）

临床分型

二甲型血友病（致病机制、相关基因、突变类型）

HA是由凝血因子Ⅷ（F Ⅷ）基因缺陷引起。FⅧ基因位于Xq28，长约186kb，由26个外显子和25个内含子组成。编码的

凝血因子Ⅷ是一种球蛋白（功能部分为Ⅷ：C，抗原部分为Ⅷ：Ag）。FⅧ基因缺陷造成FⅧ分子合成障碍或功能异常，并引起血液凝固障碍。HA的遗传基因具有广泛的异质性，自1984年公布FⅧ基因序列以来，全世界不同种族人群中发现的FⅧ基因突变有900多种，其中点突变600多种，另外还有缺失、插入、倒位及基因重排等。我国人群中发现的突变超过20种，其中内含子22倒位约占重型HA的50%，其余大多数为点突变，缺失和插入比较少见

三乙型血友病（致病机制、相关基因、突变类型）

HB是由凝血因子Ⅸ（FⅨ）基因缺陷引起的。FⅨ基因位于Xq27.1-q27.2，长34kb，由8个外显子和7个内含子组成。FⅨ基因缺陷时同样可导致凝血障碍。全世界不同种族人群中发现的凝血因子Ⅸ基因的突变有600多种，包括点突变，缺失，插入，置换等。突变呈高度异质性，FⅨ基因的CpG岛是一个突变热点。

四血友病的基因诊断

血友病的基因诊断是指利用分子生物学技术在基因水平上对血友病的基因缺陷进行检测以诊断血友病的一种方法，既可以直接明确患者基因突变类型，又可以用于携带者筛查和产前诊断。主要是血友病凝血因子基因（FⅧ/FⅨ)的序列变异检测，包括基因突变、插入、倒位等的检测。

常用的方法有：倒位PCR（IS-PCR）；长距离PCR（LD-PCR）；Southern印迹杂交；变性梯度凝胶电泳（DGGE）；高通量DNA测序；短串联重复序列（STR）连锁分析等。

五 血友病的产前诊断

对于有血友病家族史的家庭来说，通过产前诊断的方法是个有效的降低血友病患儿出生率的途径。但是仍然有1/3的血友病患儿是新发生的，没有患病家族史，即正常家庭也可能出现血友病患儿。

检测手段：可通过孕早期绒毛穿刺和孕中期羊水穿刺或脐血穿刺进行产前基因诊断。

郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心可常规开展血友病的基因诊断和产前诊断：VIII因子活性检测，VIII因子抑制物检测，血友病甲HA 的基因诊断和产前诊断，血友病乙HB的基因诊断和产前诊断等。孕11-13+6周通过绒毛膜穿刺，或孕17周以后通过羊水穿刺可进行产前基因诊断。倒位型血友病需要孕24周以后抽胎儿脐血进行产前诊断。周一至周五每天均可进行绒毛膜或羊水穿刺，不需要进行预约。